Page 119 - Revista Científica Biofar
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BIOFAR – CIENTIFICA 117
consideran inconcluyentes y no pueden ser - La frecuencia de inducción de sectores
aceptadas a la vez. mutantes se calcula aplicando la siguiente
- Esto permite una comparación de la acti- formula:
vidad genotóxica de diferentes agentes o
sustancias.
( n 10 )
-5
*
F =
N.C
Dónde:
F: frecuencia de inducción de sectores por célula
n: Nro de sectores mutantes totales.
N: Nro de alas analisadas.
C: Nro de células por ala.
Determinación de la actividad fotómetro Thermo scientific, GENESYS TM
antioxidante por DPPH 10uv a una longitud de onda de 517nm.
El estudio de la actividad antioxidante se Determinación de la actividad
llevó a cabo mediante el método antioxidante
desarrollado por Brand-Williams que tienen Para la determinación cuantitativa se utilizó
el siguiente fundamento; el radical DPPH, el método del radical libre DPPH, el cual
tiene un electrón desapareado, es de color reduce el radical 2,2-difenil-1-picrilhidracilo
azul-violeta, va decolorándose hacia (DPPH) en la 2,2-difenil-1-pricril hidrazina
amarillo pálido por la reacción con una por la acción antioxidante de compuestos
sustancia antioxidante, siendo medido que contienen grupos -OH que decoloran
6
espectrofotométricamente a 517nm. La dicho reactivo .
diferencia de absorbancia, permite - Se preparó una solución madre de DPPH
determinar el porcentaje de captación de en una concentración 10mM en etanol
radicales libres. DPPH a una concentración absoluto.
5, 6
de 20 mg/L . - Se utilizó como blanco etanol absoluto, la
muestra a analiza: Erythroxylum coca y
Preparación de la curva de calibración: como control positivo el ácido ascórbico.
- La absorbancia inicial del DPPH en el - Fueron colocados a 2ml de solución inicial
medio de la reacción se determinó DPPH 0.1mM un volumen de 50ul de
mediante una curva de calibración. muestra a diferentes concentraciones (25,
- Se preparó una solución madre de DPPH 50, 100 y 200ug/ml; preparadas a partir de
en una concentración 10mM en etanol la solución stock)
absoluto. - La mezcla se dejó en reposo en ausencia de
- A partir del cual se preparó la solución ini- la luz durante 30minutos.
cial en una concentración de 0.1mM. - Fueron leídas la absorbancia a 517nm de
- Se preparó una solución de DPPH 0,2 longitud de onda en un espectrofotómetro
TM
mg/ml en etanol absoluto y a 1ml de cada Thermo scientific, GENESYS 10uv.
muestra se le adicionó 1ml de la solución - Los resultados fueron expresados como
de DPPH preparada a una concentración porcentaje de decoloración de DPPH
de 0.02; 0.04; 0.06; 0.08mM. utilizando la siguiente formula:
- La absorbancia fue leída en un espectro-
