Page 117 - Revista Científica Biofar
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BIOFAR – CIENTIFICA 115
Todo el material vegetal fue secado a la Determinación de sólidos totales
sombra en atmósfera ambiental durante 20 Para la determinación de sólidos totales se
días. Posteriormente se separaron las hojas, utilizó la estufa y se toma tres cápsulas
se pulverizaron en un molino de cuchilla y lavadas con alcohol, secadas con algodón,
se conservaron en frascos de color ámbar dejando en la estufa por una hora, las tres
hasta la realización del tamizaje fitoquímico. capsulas fueron llevadas a un desecador por
Preparación de extractos. 15 minutos luego pesadas en la balanza
La preparación de extractos etanólico al 70% analítica para obtener el peso inicial,
y 2% ácido clorhídrico por maceración a inmediatamente se colocó un ml de extracto
partir del material pulverizado, utilizando etanólico de la hoja de coca; se pesó en la
como solvente de extracción etanol: agua balanza analítica, luego fueron llevados a la
(7:3) en una relación de 1 : 10 materia prima estufa por 4 horas a una temperatura de 105º
– solvente, de la siguiente manera: Se tomó centígrados. Pasado ese tiempo se volvieron
50g de cada materia vegetal pulverizada con a pesar previo enfriamiento en el desecador
500 ml de solvente. Fueron colocados en entre 15 y 20 minutos para eliminar el H O,
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frascos ambarados de cristal herméticamente nuevamente se lleva a la estufa FAETA por
cerrados y se maceraron por 48 horas, en 2 horas. Esta operación se repite hasta
constante agitación. Después del macerado, conseguir un peso constante. Con los
se procedió al filtrado (papel filtro). El resultados obtenidos se realizaron los
filtrado obtenido se rota evaporó hasta ¼ del cálculos correspondientes, la fórmula
o
volumen total a una temperatura de 55 C en empleada fue:
un rotaevaporador.
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% Sólidos Totales = x 100
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Screening fitoquímico cruzamientos: 1) Estándar (ST), en el que
El screening fitoquímico fue realizado con hembras vírgenes de la cepa flr3 se cruzan
el fin de detectar los diferentes metabolitos con machos del linaje mwh; 2) De Alta
secundarios en las plantas para ver a qué bioactivación (HB) donde hembras ORR se
grupo de compuestos corresponden los cruzan con machos mwh. Posteriormente
principios activos. En el trabajo se realizó se analizó la mutación inducida por los
una marcha fitoquímica preliminar y otra diferentes tratamientos en las células
marcha por fraccionamiento con los somáticas que dan origen a la formación de
solventes adecuados. las alas.
El procedimiento que se siguió es el de Olga Medio de ovoposición
de Lock (1996) que nos permitió separar Se utiliza un cuarto paquete de levadura
fracciones por solubilidad e identificar a los fresca trozada en un vaso de precipitado, se
diferentes metabolitos añadió dos cucharadas de azúcar y 20ml de
Ensayo SMART en alas de Drosophila agua sobre la levadura y se dejó reposar por
melanogaster. unos minutos. Se repitió este procedimiento
La evaluación se realizó in vivo con los el 2do y 3er día. Las moscas de cada cruce
extractos de la hoja de coca producida en el se vacciaron a los medios de ovoposición y
trópico de Cochabamba para determinar su se dejó por 8 hrs. Luego de las 8 horas se
genotoxicidad mediante la prueba de devolvió a su medio original (medio de
Mutación y Recombinación Somática cultivo) se repitió este procedimiento por
(SMART). Se realizó dos tipos de tres días.
