Page 65 - Revista Científica Biofar
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BIOFAR – CIENTIFICA
Cálculo del coeficiente de inhibición medio extracto en tubos de ensayo, a esto se
IC 50. adicionó 1600 μl de agua destilada y 200 μl
El IC50 es la concentración necesaria para del reactivo de Folin- Ciocalteu, se agito y
disminuir la concentración inicial del radical se dejó reposar durante 5 minutos, posterior
DPPH en un 50% a esto se añadió 100 μl de la solución de
Determinación de fenoles totales por carbonato de sodio. Se dejó reposar por un
método Foling Ciocalteu período de 120 minutos fuera del alcance de
El ensayo Folin-Ciocalteu permite medir el la luz.
contenido de compuestos fenólicos totales Finalmente se procedió a leer en
en productos naturales. Sin embargo, el espectrofotómetro THERMOSCIENTIFIC,
mecanismo básico del método es una a 760 nm de longitud de onda.
reacción redox por lo que puede
considerarse como otro método de medida Lectura del control positivo
de la actividad antioxidante total. La Para el control positivo se utilizó acido
oxidación de los fenoles presentes en la gálico P.A. ya que los resultados deben
muestra causa la aparición de una coloración expresarse en equivalentes de ácido gálico.
azul que presenta un máximo de absorción a Para la prueba fue necesario elaborar una
765 nm de longitud de onda y que se curva de calibración, para ello se disolvió
cuantifica por espectrofotometría en base a ácido gálico en agua hasta obtener
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una recta patrón de ácido gálico . concentraciones finales de 50; 20; 10; 5; 2,5
ppm.
Preparación del reactivo Folin- Ciocalteu Una vez preparadas las diluciones se
Para la realización de este método (Singleton procedió a colocar 100 μl de cada
y Rossi) se preparó el reactivo de Folin- concentración en tubos de ensayo, a esto se
Ciocalteu a una concentración de 1N en agua adicionó 1600 μl de agua destilada y 200 μl
destilada como solvente, a este reactivo se lo del reactivo de Folin- Ciocalteu, se agito y
protegió de la luz y se lo colocó en se dejó reposar por un período de 120
refrigeración hasta su uso. minutos y finalmente se procedió a leer en
También se hizo la preparación de una espectrofotómetro a 760 nm de longitud de
solución de carbonato de sodio (Na CO ) al onda.
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20% en agua destilada.
RESULTADOS
Lectura de los extractos de Moringa
Las muestras fueron preparadas a partir de Obtención del Extracto
la misma solución madre que se utilizó en la Los extractos fueron obtenidos mediante
prueba de antioxidante de 1000 ppm, maceración de 48 horas como se muestran
realizando las respectivas diluciones (50; 20; en la siguiente tabla:
10; 5; 2,5 ppm) colocando 100 μl del
Tabla 1. Extracto hidroalcoholico 70 % y alcohólico al 96 % de moringa
